fsplit

fsplit是用于根据barcode信息从BCL或fastq混合数据中拆分样本数据的软件。

软件环境

• python >=2.7.10, <=3.11
• bcl2fastq
• linux

安装

pip install git+https://github.com/yodeng/fsplit.git

用法

fsplit可用于fastq或bcl数据拆分。

fastq数据拆分

对于含有barcode的fastq混合数据，可根据barcode信息将其拆分为样本信息数据。

需提前为fastq数据创建索引文件，加快程序运行速度。

1) fsplit index

1.0.3之前版本采用索引多进程方式实现，1.0.4及以后版本不在需要索引。

fastq文件创建fai索引文件，输出test.fastq.fai文件，自动识别gzip压缩格式。

fsplit index -i test.fastq.gz

也可以使用samtools建立索引，fsplit兼容samtools fqidx的索引输出格式.

2) fsplit split

根据barcode序列，从fastq文件中拆分属于各样本的fastq数据。若fastq索引文件不存在，会先创建索引文件，然后运行split程序。

1.0.4及以后版本不在需要索引，直接读取fastq并处理。

fsplit split --help查看帮助：

参数	描述
-i/--input	输入的fastq文件
-I/--Input	输入的paired fastq文件, read2
-b/--barcode	barcode信息文件，两列或三列，第一列为样本名，第二列为barcode1序列，第三列为barcode2序列
-m/--mismatch	barcode拆分时运行的错配碱基数，默认0，不允许错配
-o/--output	结果输出目录，不存在会自动创建
-d/--drup	输出结果中是否去除barcode序列，默认不去除
-rc1/--rc-bc1	对barcode1进行反向互补查找
-rc2/--rc-bc2	对barcode2进行反向互补查找
--output-gzip	输出gzip压缩的fastq文件，使用python zlib接口，会减慢运行速度。

BCL数据拆分

支持BCL原始芯片测序数据的拆分，封装bcl2fastq软件，根据barcode信息拆分为各自样本的fastq数据，兼容单端或双端index拆分。

参数说明

使用fsplit bcl2fq命令，拆分bcl数据，相关参数如下：

参数	描述
-i/--input	输入的BCL数据flowcell目录
-s/--sample	sample sheet信息文件，两列或三列，空白隔开，第一列为样本名，第二列为indel1(i7)序列，第三列为index2(i5)序列
-m/--mismatch	barcode拆分时运行的错配碱基数，默认1，允许1个碱基错配
-t/--threads	运行使用的cpu核数
-o/--output	结果输出目录，不存在会自动创建
-rc1/--rc-index1	将index1(i7)序列反向互补
-rc2/--rc-index2	将index2(i5)序列反向互补
--bcl2fq	指定bcl2fastq软件路径，不指定会自动从$PATH或sys.prefix中查找

版本更新记录

version 1.0.0

• 设计多进程并发读取和运行方式
• 仅支持fastq数据拆分
• 需建立fastq索引

version 1.0.1

• 添加运行时间记录
• 优化进程共享队列，批量处理输出

version 1.0.2

• 新增BCL数据单端index拆分功能
• fastq读取索引优化

version 1.0.3

• 新增BCL双端index拆分功能
• 新增屏幕输出logging日志记录
• 优化fastq index步骤，采用稀疏索引，减小索引文件大小，加快读取速度
• 采用互斥锁取代进程共享队列

version 1.0.4

• 单线程读取，子进程解压，处理后序列直接写入文件，取消建立索引步骤，取消多进程处理，取消文件互斥锁
• split步骤同时添加golang实现gsplit.

version 1.0.5

• 新增bcl2fq子命令封装bcl2fastq软件，用于bcl数据拆分

version 1.0.6

• 新增split子命令对双端paired fastq拆分支持